【作者】鐘志敏 賴小平 黃松 張桂芳
【機構(gòu)】廣州中醫(yī)藥大學中醫(yī)藥數(shù)理工程研究院 廣東省中藥新藥研發(fā)重點實驗室
摘要:本文對石斛內(nèi)生炭角菌DNA提取方法進行優(yōu)化,并基于ITS序列及其ITS2二級結(jié)構(gòu)對其進行分子鑒定。比較試劑盒法及不同濃度(2%、3%、4%)CTAB法的DNA提取效果并對CTAB法進行優(yōu)化;進行ITS序列的擴增及ITS2二級結(jié)構(gòu)的預測。結(jié)果表明:4%的CTAB提取效果最佳,優(yōu)化的CTAB法大大縮短了DNA提取時間;ITS序列與炭角菌屬3個種的相似度均為99%,ITS2二級結(jié)構(gòu)僅與Xylaria arbuscula的二級結(jié)構(gòu)100%相似。本研究所優(yōu)化的CTAB法能為后續(xù)相關(guān)研究提供便利;結(jié)合ITS序列及ITS2二級結(jié)構(gòu)能對石斛內(nèi)生炭角菌進行準確的分子鑒定。
基金:港澳臺科技合作專項項目(2014DFH30010); 廣東省應用型科技研發(fā)專項資金重點項目(2015B020234008)~~;
關(guān)鍵詞:石斛; 炭角菌; 優(yōu)化CTAB法; 菌種鑒定;